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分享一下关于氯霉素检测试剂具体实行方法
发布时间： 2022-02-24 点击次数： 598次今天为大家分享一下关于氯霉素检测试剂具体实行方法，话不多说下面让我们一起来了解一下吧。
一、样品制备
a) 将3克已均质的样品放入15mL离心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震荡5分钟。
b) 用离心机离心1700×g10分钟，取2mL上层液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮气将有机溶剂吹干。
c) 在此玻璃管中加入正己烷1mL，先将残余物*溶解后，再加入1mL样品稀释液，震荡30秒钟。
d) 用离心机离心1700×g 10分钟，利用吸管吸去包含中问乳化层部分的上层液(正己烷)，再吸取下层液(水层)备用。
稀释倍数:1
若待测物为白虾可按以下流程将样品做8倍浓缩以增加检品敏感度
a) 将6克已均质的样品放入15mL离心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震荡5分钟。
b) 用离心机离心1700×g 10分钟，取4mL上层液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮气将有机溶剂吹干。
c) 在此玻璃管中加入正己烷2mL，先将残余物*溶解后，再加入0.5mL样品稀释液，震荡30秒钟。
d) 用离心机离心1700×g 10分钟，利用吸管吸去包含中问乳化层部分的上层液(正己烷)，再吸取下层液(水层)备用。
稀释倍数:0.125
二、操作步骤
1、于适当微孔中分别加入100mL标准溶液(0，0.05，0.15，0.45，1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前处理的样品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶标记物。
4、轻敲盘子四周，使其充分混合后于室温下避光静置温育1小时。
5、将微孔中的反应液甩掉，再将洗液加满每一微孔后甩掉，重复洗3次。
6、最后一次甩掉后，在吸水纸上拍干。
7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后，轻敲盘子四周，使其充分混合。
8、于室温下避光静置温育20分钟。
9、于每一微孔中加入100mL反应终止液。
10、用酶标仪于波长450nm下判读。
三、判定结果
1. 计算B/B0值。用样品或标准液吸光度值(B)除以零标准吸光度值(B0)再乘以100%。
2. 以B/B0值为纵坐标，以标样浓度的对数值为横坐标，做标准半对数曲线。
3. 根据每个样品的B/B0值就可从曲线上读出相对应样品的浓度。
4. 由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。- 下一篇：氯霉素检测除了主要的三类外还有其他的办法
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