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    关于莱克多巴胺检测试剂的原理及试验步骤看看那本篇吧

    发布时间: 2022-09-07  点击次数: 28次
      莱克多巴胺检测试剂盒是用于治疗哮喘的药物试剂。该试剂应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
     
      一、莱克多巴胺检测试剂盒原理
     
      莱克多巴胺检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测尿样、组织、饲料等样本中的莱克多巴胺(Ractopamine,Rac),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的莱克多巴胺和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗莱克多巴胺抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含莱克多巴胺含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中莱克多巴胺的残留量。
     
      二、适合范围:莱克多巴胺检测试剂盒可定性、定量检测动物组织(肌肉、肝脏等)、尿液、饲料、牛奶等样品中莱克多巴胺的残留量。
     
      试验步骤如下:
     
      将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
     
      实验开始前,用去离子水将20×浓缩洗涤液按20倍稀释成工作洗涤液。
     
      1、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
     
      2、加样反应:加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。
     
      3、洗涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250µl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
     
      4、显色:每孔加入底物液A50µl,再加底物液B50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟。
     
      5、终止:每孔加入终止液50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。
     
      6、测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。
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